María Viviana Valle Cabrera, Sandra Luna Martínez, Araceli Juárez Miranda, Aline Guillermina Ramírez Alvarado.
Las proteínas Monoclonales o paraproteínas son inmunoglobulinas producidas por un clon de células plasmáticas monoclonales con proliferación anormal, para evaluarlas se utiliza la electroforesis de proteínas y/o inmunofijación en donde la presencia de bandas únicas es la más común; sin embargo, en el caso de expansión clonal de dos líneas celulares se pueden ver dos bandas M distintas; esta condición es conocida como gammapatía biclonal. Es importante diferenciar una gammatía monoclonal a una dimerización, fenómeno más frecuentemente observado cuando se involucra IgA, debido a su estructura.
El objetivo del presente estudio es comprobar la eficacia del tratamiento con DTT 0.2M en inmunofijaciones que presentan bandas monoclonales dobles de tipo IgA.
Para ello se realizó la inmunofijación primaria de acuerdo a las instrucciones del fabricante (SEBIA Ref. 4309) en el equipo Hydrasis 2 Scan utilizando una dilución estándar 1:6. De acuerdo al corrimiento observado se eligieron muestras que presentaron bandas M dobles de tipo IgA. Estas muestras se sometieron a un tratamiento: 180 μL de suero+ 12μL de DTT 0.2M, se incubaron a 5 ́, 10 ́ y 15 ́ posteriormente se realizó el corrimiento por inmunofijación como se describió anteriormente.
El tratamiento con DTT 0.2M demostró ser eficiente en las 7 muestras séricas evaluadas rompiendo los enlaces disulfuro de la IgA, despolimerizando las moléculas y reduciendo las múltiples bandas a un solo pico monoclonal. Se observó que el tiempo de incubación óptimo es de 10 minutos ya que las bandas del patrón electroforético no se ven afectadas a diferencia de las tratadas a los 15 minutos.
Concluimos que, el uso de DTT 0.2M es una técnica efectiva comparada con la recomendada por el fabricante (DTT 0.5M) para evitar diagnósticos erróneos debidos a la dimerización de IgA ya que las bandas analizadas se generaron a partir de un mismo clon y no se trata de una gammapatía biclonal.
Introducción del autor